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非结核分枝杆菌肺病患者非结核分枝杆菌和下呼吸道病原菌分布及耐药性分析
潘永1，潘修成1，张瑞梅2，王春颖2，席向宇2，闫家微2，刘加彬2
基金项目：徐州市社会发展-临床医学研究（XM13B049）
1.221000江苏省徐州市，徐州医科大学研究生院
2.221004江苏省徐州市，徐州医科大学附属徐州市传染病医院感染科
通信作者：潘修成，E-mail：wljha45@163.com
DOI：10.3969/j.issn.1008-5971.2018.02.018
潘永，潘修成，张瑞梅，等.非结核分枝杆菌肺病患者非结核分枝杆菌和下呼吸道病原菌分布及耐药性分析［J］.实用心脑肺血管病杂志，2018，26（1）：72-75．
PAN Y，PAN X C，ZHANG R M，et al.Distribution and drug resistance of non-tuberculosis mycobacteria and lower respiratory tract pathogens in non-tuberlosis myeobactericum-induced pulmonary disease patients［J］．Practical Journal of Cardiac Cerebral Pneumal and Vascular Disease，2018，26（1）：72-75．
非结核分枝杆菌是指除结核分枝杆菌复合群和麻风分枝杆菌以外的分枝杆菌。非结核分枝杆菌肺病是由一组非结核分枝杆菌引起的全身疾病，主要侵袭肺部。近年来，非结核分枝杆菌肺病的发生率呈逐年上升趋势，已引起临床广泛关注［1］。据统计数据显示，我国非结核分枝杆菌肺病发生率由20世纪90年代的4.9%上升至2010年的22.2%［2］。非结核分枝杆菌肺病与肺结核的临床症状及体征相似，且非结核分枝杆菌肺病对多种一线抗菌药物耐药，易误诊为耐多药肺结核［3-4］。目前，非结核分枝杆菌肺病尚无统一治疗方案。本研究旨在分析非结核分枝杆菌肺病患者非结核分枝杆菌和下呼吸道病原菌分布及耐药性，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选取2014—2016年徐州医科大学附属徐州市传染病医院收治的非结核分枝杆菌肺病患者152例，均符合《非结核分枝杆菌病诊断与治疗专家共识》［5］中的非结核分枝杆菌肺病诊断标准。排除标准：（1）存在心、肝、肾等重要脏器功能不全者；（2）存在糖尿病、恶性肿瘤及艾滋病者；（3）存在免疫系统疾病者；（4）存在精神疾病者。所有患者中男106例，女46例；年龄21～84岁，平均年龄（63.5±10.2）岁；基础疾病：支气管扩张54例，慢性阻塞性肺疾病50例，肺炎24例，慢性肺源性心脏病18例，肺结核6例。本研究经徐州医科大学附属徐州市传染病医院医学伦理委员会审核批准，患者及其家属均签署知情同意书。
1.2 方法
1.2.1 标本采集 所有患者于晨起刷牙前采集痰液标本，为减少微生物及食物残渣对标本造成的污染，嘱患者咳痰前用清水漱口，后采用有盖的无菌广口瓶放置标本，咳痰时患者下唇紧按在容器边缘，深吸一口气后咳出痰液。
1.2.2 病原菌鉴定及药敏试验 （1）标本接种于改良罗氏固体培养基，若形成菌落则鉴定为结核分枝杆菌，并采用罗氏比例法进行药敏试验；（2）标本接种于含噻吩二羧酸和对硝基苯甲酸的培养基，若形成菌落则可初步鉴定为非结核分枝杆菌，并采用全自动微生物鉴定系统进行菌种鉴定，采用绝对浓度间接法进行药敏试验。
2 结果
2.1 非结核分枝杆菌菌种分布 152例非结核分枝杆菌肺病患者共检出非结核分枝杆菌152株，分离鉴定出7个非结核分枝杆菌菌种。其中快速生长群64株（占42.11%），以龟/脓肿分枝杆菌（占78.13%）为主；缓慢生长群88株（占57.89%），以鸟分枝杆菌复合群（占68.18%）为主，详见表1。
2.2 非结核分枝杆菌的耐药率 龟/脓肿分枝杆菌对链霉素、异烟肼、利福平的耐药率较高，均为100.00%；鸟分枝杆菌复合群对链霉素、异烟肼、对氨基水杨酸、氧氟沙星的耐药率较高，均为100.00%，详见表2。
2.3 下呼吸道病原菌分布 152例非结核分枝杆菌肺病患者下呼吸道样本共分离出病原菌88株，其中革兰阴性菌53株（占60.23%），真菌32株（占36.36%），革兰阳性菌3株（占3.41%）。革兰阴性菌以肺炎克雷伯菌（占22.64%）为主，真菌以白色假丝酵母菌（占84.37%）为主，革兰阳性菌均为金黄色葡萄球菌（占100.00%），详见表3。
2.4 下呼吸道革兰阴性菌的耐药率 肺炎克雷伯菌对氨苄西林的耐药率为100.00%，对呋喃妥因的耐药率为83.33%，对其他常见抗菌药物敏感性较高，详见表4。
3 讨论
徐州地区位于江苏北部、黄淮平原南部，是淮海经济区中心城市，也是我国非结核分枝杆菌肺病高发地区之一。非结核分枝杆菌对酸和碱的敏感度较高，对常规抗菌药物耐受［6］，现已发现约150种非结核分枝杆菌，其中致病菌较少（包括龟/脓肿分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌、胞内分枝杆菌等）［7］。非结核分枝杆菌广泛分布于自然界中的土壤、灰尘及水源等，入侵人体肺部、骨骼、关节及软组织会造成结核样病变［8］。近年来，随着非结核分枝杆菌细菌学和生物学鉴定技术的不断发展及人口老龄化社会进程加剧，非结核分枝杆菌肺病发生率逐渐升高［9］。
本研究结果显示，152例非结核分枝杆菌肺病患者共检出非结核分枝杆菌152株，其中快速生长群64株（占42.11%），以龟/脓肿分枝杆菌为主；缓慢生长群88株（占57.89%），以鸟分枝杆菌复合群为主，提示152例非结核分枝杆菌肺病患者非结核分枝杆菌以缓慢生长群为主，且鸟分枝杆菌复合群最为常见；龟/脓肿分枝杆菌对链霉素、异烟肼、利福平的耐药率均为100.00%；鸟分枝杆菌复合群对链霉素、异烟肼、对氨基水杨酸、氧氟沙星的耐药率均为100.00%，提示非结核分枝杆菌肺病患者对大部分抗菌药物耐药。因此，临床治疗非结核分枝杆菌肺病患者时应根据非结核分枝杆菌菌种类型选择适合的抗菌药物［10-11］。研究表明，阿奇霉素及克拉霉素是目前治疗胞内分枝杆菌的新型大环内酯类药物，其对龟/脓肿分枝杆菌及偶发分枝杆菌具有较好抗菌效果；堪萨斯分枝杆菌可采用利福平、乙胺丁醇及异烟肼联合治疗［12］。
非结核分枝杆菌肺病患者多伴有肺部基础疾病，且除感染非结核分枝杆菌外，常合并其他病原菌感染［12-13］。本研究对152例非结核分枝杆菌肺病患者痰液标本进行病原菌培养及药敏试验，结果显示，152例非结核分枝杆菌肺病患者下呼吸道样本共分离出病原菌88株，其中革兰阴性菌53株（占60.23%），真菌32株（占36.36%），革兰阳性菌3株（占3.41%）。革兰阴性菌以肺炎克雷伯菌为主，真菌以白色假丝酵母菌为主，革兰阳性菌均为金黄色葡萄球菌，提示非结核分枝杆菌肺病患者下呼吸道病原菌以革兰阴性菌为主，且肺炎克雷伯菌最为常见；药敏试验结果显示，肺炎克雷伯菌对氨苄西林的耐药率为100.00%，对呋喃妥因的耐药率为83.33%，对其他常见抗菌药物敏感性较高，提示非结核分枝杆菌肺病患者下呼吸道病原菌对大部分抗菌药物敏感，临床可根据非结核分枝杆菌肺病患者下呼吸道病原菌及药敏试验结果合理选择抗菌药物［14］。
综上所述，非结核分枝杆菌肺病患者非结核分枝杆菌以缓慢生长群为主，且对大部分抗菌药物耐药；下呼吸道病原菌以革兰阴性菌为主，且对大部分抗菌药物敏感；临床应根据药敏试验结果合理选择抗菌药物，并积极研发新型抗菌药物。
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（收稿日期：2017-11-08；修回日期：2018-01-20）
（本文编辑：李洁晨）